期刊简介

               本刊系肿瘤专业的学术刊物,主要报道肿瘤基础研究、实践研究、临床及流行病学研究成果。                

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  • 杂志名称:肿瘤杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:上海市肿瘤研究所 上海交通大学医学院附属仁济医院
  • 国际刊号:1000-7431
  • 国内刊号:31-1372/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中文核心期刊期刊收录:国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 医学文摘, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
肿瘤杂志2006年第09期

短发夹RNA抑制喉癌细胞hTERT基因表达及诱导细胞凋亡

陈始明;陶泽璋;池花明;刘丹;李志华;詹汉章

关键词:喉肿瘤, 端粒末端转移酶, RNA干扰, 细胞凋亡, Hep-2细胞, 端粒酶逆转录酶
摘要:目的:探讨DNA载体途径的RNA干扰技术抑制人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达及诱导喉癌细胞Hep-2凋亡的作用.方法:构建靶向hTERT mRNA的质粒pshRNA1、pshRNA2及对照质粒pshRNA3、pEGFP,并将其分别转染喉鳞癌Hep-2细胞.共聚焦荧光显微镜观察质粒转染及表达情况;RT-PCR测定hTERT mRNA表达;Western印迹测定hTERT蛋白表达;末端重复片断扩增-酶联免疫吸附(TRAP-ELISA)方法测定细胞端粒酶活性;MTT法研究细胞增殖活性变化;原位细胞凋亡(TUNEL)及透射电子显微镜研究细胞凋亡.结果:①共聚焦荧光显微镜下见大量的细胞呈现绿色荧光,与其他组比较,pshRNA1、2组呈现荧光的死亡细胞显著增加.②pshRNA1、2转染细胞后hTERT mRNA及hTERT蛋白表达显著降低;其端粒酶活性明显受到抑制:转染后2 d pshRNA1组活性为:0.159±0.039、pshRNA2组活性为0.163±0.028,与空白对照组1.523±0.076比较,差异有非常显著性(P<0.005).③pshRNA1、2转染细胞后可显著抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡.这两组细胞透射电镜可见典型细胞凋亡特征.结论:DNA载体途径的RNA干扰技术能有效抑制hTERT基因的表达及端粒酶活性并诱导癌细胞凋亡,此法可能成为抑制肿瘤细胞的新途径.