期刊简介
本刊系肿瘤专业的学术刊物，主要报道肿瘤基础研究、实践研究、临床及流行病学研究成果。
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- 杂志名称：肿瘤杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：上海市肿瘤研究所 上海交通大学医学院附属仁济医院
- 国际刊号：1000-7431
- 国内刊号：31-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文核心期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 医学文摘, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
血浆Ras相关区域家族蛋白1A基因甲基化在肝细胞癌分子诊断中的价值
费伯健；黄朝晖；华东；胡瑜；程之红；余坚
关键词：癌, 肝细胞, DNA甲基化, 血浆, 分子诊断技术, 聚合酶链反应, 限制性内切酶, Ras相关区域家族蛋白1A
摘要：目的:建立一种可检测微量DNA标本中DNA甲基化的甲基化敏感性限制性内切酶-定量PCR(methylation-sensitive restriction enzymes-based quantitative PCR,MSRE-qPCR)方法,并运用该技术探讨血浆Ras相关区域家族蛋白1A(Ras association domain family 1A,RASSFL4)基因甲基化检测在肝细胞癌(hepatocellutarcarcinoma,HCC)非侵入性诊断中的价值.方法:用MSRE Hba I消化DNA样品,再用qPCR技术分析酶切结果,建立检测RASSF1A基因甲基化的MSRE-qPCR方法.以45例肝组织(20对HCC患者手术切除肿瘤标本及匹配非癌组织和5例正常肝)为材料,测试该方法的应用价值;运用亚硫酸氢盐测序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)技术进行进一步验证,并与甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)方法相比较.再运用该技术检测150例血浆标本(包括72例HCC患者、37例肝硬化或慢性肝炎等良性病变患者和41例健康对照)的RA88F1A基因甲基化状态,并分析其与HCC患者临床病理参数的关系.结果:MSRE-qPCR法可定量检测低至1%以下的RASSF1A甲基化片段.20例HCC组织中有14例(70%)发生RASSF1A高甲基化,对应非癌组织中RASSF1A甲基化阳性率为25%,而5例正常肝组织均为阴性.MSRE-qPCR结果经BSP验证无误,且与MSP检测结果具有较好的一致性.HCC患者血浆RA88F1A甲基化阳性率(47/72,65.3%)显著高于健康对照(1/41,2.4%)和肝良性病变组(3/37,8.1%),差异均有统计学意义(P<0.000 1).联合检测血浆RASSF1A甲基化与血清AFP可显著提高HCC诊断效率.结论:建立的MSRE-qPCR方法要求样本少、操作简便、成本低廉,可定量检测RASSF1A基因甲基化水平.血浆RA88F1A甲基化分析对于HCC的非侵入性诊断具有重要价值.
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