期刊简介
本刊系肿瘤专业的学术刊物,主要报道肿瘤基础研究、实践研究、临床及流行病学研究成果。
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- 杂志名称:肿瘤杂志
- 主管单位:中华人民共和国教育部
- 主办单位:上海市肿瘤研究所 上海交通大学医学院附属仁济医院
- 国际刊号:1000-7431
- 国内刊号:31-1372/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中文核心期刊期刊收录:国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 医学文摘, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
下调hnRNP A2/B1基因表达对骨肉瘤MG-63细胞生长的影响及其机制
陈倩竹;马磊;陈欢;蒋电明;李龙江
关键词:骨肉瘤, 核内不均一核糖核蛋白A-B组, 细胞增殖, 细胞凋亡, 异种移植模型抗肿瘤试验
摘要:目的:通过下调核内不均一核糖核蛋白A2/B1 (heterogeneous-nuclear ribonucleoprotein A2/B1,hnRNP A2/B1)的表达,探讨该基因对骨肉瘤MG-63细胞体内外生长的作用及其分子机制.方法:将细胞分为空白对照组(未转染)、阴性对照组(转染阴性对照质粒)和hnRNP A2/B1下调组(转染shRNA-hnRNP A2/B1干扰质粒).质粒转染骨肉瘤MG-63细胞后,观察绿色荧光蛋白的表达,以鉴定转染效果.采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测3组细胞中hnRNP A2/B1、磷酸化的AktThr308(phosphorylated AktThr308,p-AktThr308)、p-AktSer473及Akt下游分子p21、p27、cleaved caspase-3和Bcl-2的表达变化;MTT法和FCM法分别检测各组细胞的增殖活力、周期分布和早期凋亡率.将阴性对照组和hnRNP A2/B1下调组细胞分别接种入同一裸鼠的对称部位皮下组织,观察移植瘤生长情况,并采用免疫组织化学法检测各组移植瘤组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和Ki-67的表达.结果:阴性对照组和hnRNP A2/B1下调组细胞中均有绿色荧光蛋白表达,说明质粒转染成功.与空白对照组和阴性对照组相比,hnRNP A2/B1下调组中hnRNP A2/B1、p-AktThr308、p-AktSer473和Bcl-2表达水平显著降低(P值均< 0.05),且p21、p27和cleaved caspase-3表达水平明显升高(P值均< 0.05);hnRNP A2/B1下调组细胞活力明显降低(P<0.05),细胞周期阻滞于G1期(P<0.01),S期细胞比例降低(P<0.01),同时细胞的早期凋亡率升高(P<0.001).动物体内研究证实,hnRNP A2/B1下调组裸鼠移植瘤体积明显小于阴性对照组(P<0.05),并且hnRNP A2/B1下调组移植瘤组织中PCNA和Ki-67的表达水平明显降低(P值均<0.05).结论:下调hnRNP A2/B1基因表达能够抑制骨肉瘤细胞的生长,其机制可能涉及Akt信号通路的调控.
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