期刊简介
本刊系肿瘤专业的学术刊物，主要报道肿瘤基础研究、实践研究、临床及流行病学研究成果。
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- 杂志名称：肿瘤杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：上海市肿瘤研究所 上海交通大学医学院附属仁济医院
- 国际刊号：1000-7431
- 国内刊号：31-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文核心期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 医学文摘, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
BRAＦV600E突变基因沉默可抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖
王洪鹏；周晓红；李真华；张玉莲；吴剑；何云
关键词：甲状腺肿瘤, 癌, 乳头状, 原癌基因蛋白质B-raf, RNA干扰, 细胞增殖, 细胞周期
摘要：目的:通过RNA干扰技术使v-raf鼠类肉瘤滤过性病毒致癌基因同源体B1 (v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1,BRAF)的突变基因BRAFV600E表达沉默,探讨该基因沉默在甲状腺乳头状癌细胞体外增殖中的作用.方法:将携带靶向BRAFV600E基因的短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)的质粒载体(命名为BRAFV600E-shRNA)转染甲状腺乳头状癌CGTHW3细胞株,然后采用半定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测BRAFV600E-shRNA转染对BRAFV600E突变基因表达的抑制作用,以及丝裂原细胞外激酶/细胞外信号调节激酶(mitogen extracellular linase/extracellular signal-regulated kinase,MEK/ERK)信号通路相关蛋白表达水平的变化;采用MTT法检测BRAFV600E突变基因沉默后甲状腺乳头状癌细胞体外增殖能力的变化;采用FCM法检测细胞周期分布的变化.结果:特异性BRAFV600E-shRNA转染可明显抑制甲状腺乳头状癌细胞中BRAFV600E突变基因的mRNA和蛋白表达,且使MEK/ERK信号通路中Ras、磷酸化MEK (phospho-MEK,p-MEK)和p-ERK蛋白的表达量明显减少(P值均＜ 0.05).与未转染的空白对照组相比,BRAFV600E-shRNA转染后72h时CGTHW3细胞的增殖活性明显降低(P＜0.05);转染组中G0/G1期细胞所占比例明显高于空白对照组,而S期细胞所占比例明显降低(P值均＜ 0.05).结论:BRAFV600E突变基因沉默可能通过阻断MEK/ERK信号通路,有效抑制甲状腺乳头状癌细胞的体外增殖.
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