期刊简介
本刊系肿瘤专业的学术刊物，主要报道肿瘤基础研究、实践研究、临床及流行病学研究成果。
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- 杂志名称：肿瘤杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：上海市肿瘤研究所 上海交通大学医学院附属仁济医院
- 国际刊号：1000-7431
- 国内刊号：31-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文核心期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 医学文摘, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
沉默ESRP1基因表达对卵巢癌OVCAR5细胞中FGFR2亚型转化的影响
郭欣；易祎；杨宇；胡锦辉；李娜；张米妮；朱琳；黄石榴；孙贤青
关键词：卵巢肿瘤, 上皮剪接调节蛋白1, 受体, 成纤维细胞生长因子, 2型, 上皮-间质转化
摘要：目的:研究沉默上皮剪接调节蛋白1(epithelial splicing regulatory protein 1,ESRP1)基因表达对卵巢癌OVCAR5细胞中成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)亚型转换的影响.方法:构建靶向ESRP1基因的ESRP1-shRNA慢病毒表达载体(pLVTHM/ESRP1-shRNA1和pLVTHM/ESRP1-shRNA2), 同时设置阴性对照(negative control,NC)质粒(pLVTHM/NC-shRNA);将3种质粒分别转染到293T细胞中制备慢病毒.慢病毒感染卵巢癌OVCAR5细胞后,分别采用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测ESRP1 mRNA及蛋白的表达水平;采用限制性内切酶AvaⅠ和HinC Ⅱ检测沉默ESRP1基因后对FGFR2亚型转换的影响;MTT法检测沉默ESRP1基因后对OVCAR5细胞增殖的影响;蛋白质印迹法检测上皮标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、间质标志物N-钙黏蛋白(N-cadherin)及β-链蛋白(β-catenin)表达的变化.结果:成功构建靶向ESRP1基因的shRNA慢病毒表达载体并包装获得慢病毒;与阴性对照组比较,靶向ESRP1基因的shRNA能明显抑制OVCAR5细胞中ESRP1 mRNA及蛋白的表达(P值均＜0.05);沉默ESRP1基因的表达能诱导OVCAR5细胞中FGFR2由上皮亚型(FGFR2b)向间质亚型(FGFR2c)的转换,并促进OVCAR5细胞的增殖(P＜0.05);同时,下调E-cadherin的表达水平而上调N-cadherin的表达水平,并激活β-catenin (P值均＜0.05).结论:沉默ESRP1基因表达能诱导OVCAR5细胞中FGFR2亚型的转换,促进OVCAR5细胞增殖,并诱导OVCAR5细胞发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),该过程可能涉及Wnt/β-catenin信号通路.
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