期刊简介
本刊系肿瘤专业的学术刊物，主要报道肿瘤基础研究、实践研究、临床及流行病学研究成果。
往期目录
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>肿瘤杂志
- 杂志名称：肿瘤杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：上海市肿瘤研究所 上海交通大学医学院附属仁济医院
- 国际刊号：1000-7431
- 国内刊号：31-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文核心期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 医学文摘, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
shRNA干扰己糖激酶Ⅱ基因表达对人淋巴瘤细胞恶性生物学行为的影响
许壁榆；邵霞；张义炜；蔡佳翌；陈芳源；王婷
关键词：淋巴瘤, 非霍奇金, 己糖激酶Ⅱ, 细胞凋亡, 抗药性, 肿瘤, 糖酵解
摘要：目的:观察shRNA干扰己糖激酶(hexokinase,HK)Ⅱ基因表达对人淋巴瘤Raji和SU-DHL-4细胞代谢、增殖、凋亡及耐药的影响,初步评价HK Ⅱ基因靶向治疗在淋巴瘤中的潜在应用前景.方法:构建慢病毒介导的shRNA靶向干扰HK Ⅱ基因表达的淋巴瘤细胞株Raji和SU-DHL-4(HK Ⅱ shRNA转染组),同时设置阴性shRNA转染对照组.采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测细胞中HK ⅡmRNA和蛋白的表达水平.锥虫蓝拒染法检测细胞存活数并绘制生长曲线;CCK-8法检测多柔比星(doxorubicin,DOX)对淋巴瘤细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50).FCM法分析细胞周期分布及细胞凋亡.蛋白质印迹法检测细胞中凋亡相关蛋白caspase-3及其剪切体、Bcl-2和Bcl-6的表达;分别应用乳酸和葡萄糖检测试剂盒检测细胞培养上清液中乳酸和葡萄糖的浓度.结果:与空质粒转染对照组细胞相比,HK Ⅱ shRNA转染组细胞中HK ⅡmRNA及蛋白的表达水平均明显降低(P值均＜0.05).shRNA干扰HK Ⅱ基因表达能抑制2种淋巴瘤细胞的增殖活性(P值均＜ 0.01),并使细胞周期阻滞在G0/G1期(P值均＜0.05),同时促进细胞凋亡(P值均＜0.01).与对照组细胞相比,HK Ⅱ基因沉默可降低DOX对2种淋巴瘤细胞的IC50值(P值均＜0.05),抑制细胞中葡萄糖消耗(P值均＜ 0.05),减少乳酸生成(P值均＜ 0.01).与对照组细胞相比,HK Ⅱ shRNA转染后2种淋巴瘤细胞中Bcl-2蛋白的表达水平明显降低(P值均＜0.05),而caspase-3剪切体表达水平明显升高(P值均＜ 0.05);加入DOX作用后,2种淋巴瘤细胞的Bcl-2表达水平无明显差异(P值均＞0.05),但HK Ⅱ shRNA转染组细胞中caspase-3前体蛋白表达水平明显降低(P值均＜0.01),而caspase-3剪切体表达水平升高更加明显(P值均＜0.05).结论:shRNA干扰HK Ⅱ基因表达可抑制淋巴瘤细胞增殖,促进细胞凋亡,纠正细胞糖酵解代谢表型,提高细胞对化疗药物DOX的敏感性.提示HK Ⅱ基因可能是治疗复发或耐药侵袭性淋巴瘤的潜在靶点.
友情链接