期刊简介
本刊系肿瘤专业的学术刊物，主要报道肿瘤基础研究、实践研究、临床及流行病学研究成果。
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- 杂志名称：肿瘤杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：上海市肿瘤研究所 上海交通大学医学院附属仁济医院
- 国际刊号：1000-7431
- 国内刊号：31-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文核心期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 农业与生物科学研究中心文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 医学文摘, 剑桥科学文摘, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
过表达钾离子通道调节蛋白抑制肝癌细胞增殖、迁移及侵袭
胡啸；王艳杰；陈德
关键词：肝肿瘤, 钾通道, 基因表达调控, 细胞增殖, 细胞运动, 上皮-间质转化, 基因, 钾离子通道调节子
摘要：目的:检测钾离子通道调节蛋白(K+ channel regulator,KCNRG)在肝癌细胞中的表达情况,并探讨上调KCNRG基因表达对肝癌细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭和上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)能力的影响.方法:首先采用RT-PCR、实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测人正常肝上皮永生化细胞THLE-3和肝癌细胞BEL-7402、SMMC-7721、MHCC-LM3及SK-HEP1中KCNRG mRNA和蛋白的表达水平.然后采用脂质体转染法将KCNRG过表达质粒KCNRG-pcDNA3.1(+)转染至肝癌细胞SK-HEP1和MHCC-LM3中,同时设置未转染的空白对照组和转染空载体的阴性对照组.采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证KCNRG过表达效果后,分别采用细胞计数法、克隆形成实验和Transwell小室法分别检测肝癌细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力的变化情况,并采用蛋白质印迹法检测肝癌细胞中EMT标志分子的表达变化.结果:肝癌细胞中KCNRG mRNA和蛋白表达水平明显低于人正常肝上皮永生化细胞THLE-3 (P值均＜0.01),尤以肝癌细胞SK-HEP1和MHCC-LM3中的表达水平低.KCNRG过表达质粒转染后,肝癌细胞SK-HEP1和MHCC-LM3中KCNRG基因表达水平明显上调(P值均＜0.01),N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平明显下调(P值均＜0.01),E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平明显上调(P值均＜0.01),并且2种肝癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力均被明显抑制(P值均＜0.01).结论:肝癌细胞中KCNRG基因表达水平明显低于正常肝细胞.KCNRG基因表达上调可以抑制肝癌细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭及EMT.
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